Caspase-3 siRNA减少骨髓间充质干细胞稳定株细胞凋亡的实验研究


















	

首页>当期快报>2014年第5卷第5期  实验研究 字号 收藏本页
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Caspase-3 siRNA减少骨髓间充质干细胞稳定株细胞凋亡的实验研究

Experimental study on the Caspase-3 siRNA decreases apoptosis in stable cell lines of bone marrow mesenchymal stem cells

刘立宝,华平,黄蕾,张军航,廖洪映,胡爱玲,许世磊

Liu Libao, Hua Ping, Huang Lei, Zhang Junhang, Liao Hongying, Hu Ailing,Xu Shilei

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引用本文:

【摘要】  目的  探讨在体外采用Caspase-3小干扰核糖核酸(siRNA)减少骨髓间充质干细胞(MSC)稳定株细胞凋亡的方法,以构建稳定表达的MSC细胞株。方法  使用逆转录病毒包装系统,在293FT细胞中进行包装生产含Caspase-3 siRNA的病毒颗粒,然后转染给大鼠MSC,对转染后的细胞进行筛选并扩增培养得到稳定株细胞。根据逆转录病毒的特性,利用蛋白质印迹法(Western blot)和实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-QPCR)对细胞株进行稳定表达的鉴定,用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记测定(TUNEL)法对稳定株细胞和正常MSC进行凋亡检测并进行定位比较。结果  与正常细胞比较,MSC稳定株细胞中的caspase-3蛋白表达量和mRNA含量明显降低;在同样体外环境下,MSC稳定株细胞的凋亡数量比正常细胞明显减少。结论  利用逆转录病毒包装系统可得到稳定表达Caspase-3 siRNA的MSC稳定株细胞。

关键词: Caspase-3基因;核糖核酸干扰;逆转录病毒;细胞凋亡;骨髓间充质干细胞

中图分类号: R617

基金资助: 广东省科技计划项目基金(2007B050200011)

作者单位: 中山大学附属第三医院心胸外科(刘立宝、黄蕾、张军航、廖洪映、胡爱玲、许世磊),中山大学孙逸仙纪念医院心脏外科(华平)

作者简介: 通讯作者:华平,Email:huaping88@sina.com

收稿日期: 2016-02-26

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