小鼠胰岛分离纯化方法研究 
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小鼠胰岛分离纯化方法研究

Research of isolation and purification of pancreatic islets in mice

颜迪恩;周迎生;高秀莹;赵一楠

Yan Dien; Zhou Yingsheng; Gao Xiuying; Zhao Yinan

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引用本文:

【摘要】  目的 探讨可提高胰岛产量和功能活性的小鼠胰岛分离、纯化的方法。方法 通过胆总管逆行灌注胶原酶溶液消化小鼠胰腺,经不连续密度梯度离心后,人工挑取、纯化胰岛。过夜培养后,用葡萄糖刺激胰岛素分泌实验(GSIS),检测胰岛功能。电镜观察胰岛β细胞亚细胞结构变化。 结果 利用该改良方法平均每只小鼠可收集(200土20)个胰岛,胰岛直径大小为(175±22)μm。GSIS结果发现胰岛素水平在低糖(2.8 mmol/L)和高糖(16.7 mmol/L)刺激下分别为(0.33±0.07)、(1.36±0.47) ng/(islet·60 min),高糖刺激的胰岛素水平是低糖刺激的4.12倍,差异有统计学意义(P<0.05)。电镜证实胰岛β细胞膜、线粒体膜完整,胞内可见大小不一胰岛素分泌泡。结论 胆总管逆行灌注胶原酶消化小鼠胰腺,体外不连续密度梯度离心联合人工挑取的方法是一种简便、快捷、稳定的小鼠胰岛分离方法,小鼠胰岛产量较高、形态完整,且GSIS反应性良好。

关键词: 小鼠;胰岛;分离纯化;胰岛分泌

中图分类号: R617

基金资助: 国家自然科学基金(81041024);教育部留学回国人员科研启动基金(2012-940);北京市卫生系统高层次卫生技术人才培养项目(2013-2-006)

作者单位: 北京市心肺血管疾病研究所;首都医科大学附属北京安贞医院内分泌代谢科

作者简介: 通讯作者:周迎生,Email:zhouys01@sina.cn

收稿日期: 2015-09-07

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