免疫磁珠两步法体外分离纯化小鼠脾脏CD4+CD25+调节性T细胞的应用研究 


















	

首页>当期快报>2011年第2卷第6期  实验研究 字号 收藏本页
阅读全文:


免疫磁珠两步法体外分离纯化小鼠脾脏CD4+CD25+调节性T细胞的应用研究

黄克力 朱平 卢聪 朱小兰 麦明杰 沈二霞 吴若彬 刘怀普 黄晶晶 王巍 谢波

Author:HUANG Ke-li ZHU Ping LU Cong ZHU Xiao-lan MAI Ming-jie SHEN Er-xia WU Ruo-bin LIU Huai-pu HUANG Jing-jing WANG Wei XIE Bo

全文: PDF (225 KB) HTML(无)

引用本文:

目的 研究免疫磁珠两步法体外分离纯化小鼠脾脏CD4+CD25+调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)的效果.方法 将C57BL/6(H-2b)小鼠脾脏剪碎、过滤、去除红细胞后离心洗涤,获得小鼠脾细胞悬液.用Ficoll法分离获得单个核细胞后,通过免疫磁珠阴性加阳性选择两步法分离获得CD4+CD25+Treg和CD4+CD25-Treg.用流式细胞仪检测所获得CD4+CD25+Treg的纯度,并比较纯化分离前后脾脏CD4+CD25+Treg的比例,用台盼蓝染色后计算CD4+CD25+Treg的细胞存活率,并对分离后的细胞表型进行鉴定.结果 免疫磁珠阴性加阳性选择两步法纯化分离后CD4+CD25+Treg的纯度为(88.7±2.9)%,分离前CD4+CD25+Treg的平均比例为11.6 %,纯化分离后CD4+CD25+Treg的平均比例为93.7 %.细胞存活率为(93.7±4.1)%.与CD4+CD25-Treg相比,CD4+CD25+Treg的CD44表达略有增加(P>0.05),CD45RB的表达明显下降(P<0.05),CTLA- 4和Foxp3的表达明显增加(均为P<0.05).结论 使用免疫磁珠两步法分离纯化,能避免激惹CD4分子,可获得高纯度且具有天然CD4+CD25+Treg表型的细胞.

关键词: 免疫磁珠两步法,CD4+CD25+调节性T细胞,流式细胞术,小鼠

中图分类号: R617

基金资助: 科技部国际合作项目,广东省自然科学基金

作者单位: 广东省心血管病研究所心外科广东省人民医院广东省医学科学院,510080 中山大学免疫学教研室

作者简介:

收稿日期: 2016-10-17

相关文献:

免疫磁珠两步法体外分离纯化小鼠脾脏CD4+CD25+调节性T细胞的应用研究


返回上一层

上一篇      自然杀伤细胞在移植免疫中的双重作用

下一篇      肾移植术后新发自体肾、输尿管、膀胱多发性原发恶性肿瘤1例报告

图库



友情链接/合作伙伴

版权所有《器官移植》编辑部

电话:020-38736410   传真:020-85253160   Email:organtranspl@163.com

地址:广州市天河路600号中山大学附属第三医院    邮政编码:510630

备案号:粤ICP备14057892-1

收缩
收缩