大鼠骨髓来源树突状细胞体外培养体系的优化
首页>当期快报>2011年第2卷第3期  实验研究字号收藏本页
阅读全文:


大鼠骨髓来源树突状细胞体外培养体系的优化

汪国营 张琪 刘炜 陈文捷 李敏如 李团结 陈伟 陈规划

WANG Guo-ying ZHANG Qi LIU Wei CHEN Wen-jie LI Min-ru LI Tuan-jie CHEN Wei CHEN Gui-hua

全文: PDF (751 KB) HTML(无)

引用本文:

目的 探讨优化大鼠骨髓来源树突状细胞(DC)体外培养体系的方法.方法 应用重组大鼠粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(recombinant rat GM-CSF,rrGM-CSF) 20 μg/L和重组大鼠白介素(recombinant rat interleukin,rrIL)- 4 10 μg/L诱导分化Lewis大鼠骨髓单个核细胞,获得未成熟DC(immature DC,imDC).第6日加入终含量为100 μg/L的脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)刺激细胞成为成熟DC(mature DC,mDC).用倒置相差显微镜观察细胞形态,流式细胞术鉴定细胞表型、双抗夹心酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测DC培养上清液中白介素(IL)-12、IL-10的含量,并以Brown Norway大鼠脾脏 T 淋巴细胞为反应细胞,做混合淋巴细胞反应检测,观察DC刺激 T 淋巴细胞增殖能力.结果 经细胞形态学、流式细胞术及混合淋巴细胞反应三方面鉴定,证实所培养细胞为DC.体外培养第6日,见大量增殖细胞集落,细胞高表达OX62.LPS刺激细胞后,细胞伪足样突起明显增多,细胞逐渐呈半悬浮、悬浮生长,细胞表面高表达主要组织相容性抗原复合体(MHC)Ⅱ类分子和共刺激分子(CD40、CD86).与imDC比较,mDC分泌IL-10和IL-12显著增加,刺激同种异体 T 淋巴细胞增殖的能力显著提高.结论 通过采用调整rrGM-CSF和rrIL- 4 的用量等方法优化体外培养体系诱导大鼠骨髓单个核细胞,可分化出大量骨髓源性DC.

关键词: 树突状细胞,重组大鼠粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子,重组大鼠白介素-4,脂多糖,混合淋巴细胞反应,细胞培养

中图分类号: R617

基金资助: 国家重点基础研究发展计划(973计划)课题,国家自然科学基金资助项目

作者单位: 中山大学附属第三医院肝移植中心,中山大学器官移植研究所,广东省器官移植研究中心,广州,510630

作者简介:

收稿日期: 2016-10-14

相关文献:

大鼠骨髓来源树突状细胞体外培养体系的优化


返回上一层

上一篇      我国肝移植病理学的发展回顾与思考

下一篇      肝移植术后肝动脉血栓的处理及预后

图库



友情链接/合作伙伴

版权所有《器官移植》编辑部

电话:020-38736410   传真:020-85253160   Email:organtranspl@163.com

地址:广州市天河路600号中山大学附属第三医院    邮政编码:510630

备案号:粤ICP备14057892-1

收缩
收缩