N-(3,4-二甲氧基肉桂酰)邻氨基苯甲酸介导小鼠皮肤移植免疫负向调节的作用及机制研究
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N-(3,4-二甲氧基肉桂酰)邻氨基苯甲酸介导小鼠皮肤移植免疫负向调节的作用及机制研究

黄君龄 王祥慧 郭庆 徐达 周佩军 邵琨

HUANG Jun-ling WANG Xiang-hui GUO Qing XU Da ZHOU Pei-jun SHAO Kun

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引用本文:

目的 研究N-(3,4-二甲氧基肉桂酰)邻氨基苯甲酸[N-(3,4-dimethoxycinnamonyl)anthranilic acid,3,4-DAA]在小鼠皮肤移植中的免疫负调节作用,并探索其发挥作用的机制.方法 体外实验中,取同种异基因小鼠皮肤移植7 d后的BALB/C小鼠脾脏制得淋巴细胞单细胞悬液,一半用四甲基偶氮唑蓝比色法(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)检测小鼠脾脏淋巴细胞生长抑制率;另一半分为3组,分别加入RPMI 1640培养液10 μl(c1组)、3,4-DAA 100 μmol/L(c2组)、加入3,4-DAA 200 μmol/L(c3组),培养72 h,进行病理学检查.同时用蛋白免疫印迹法检测吲哚胺2,3-二氧化酶(indoleamine 2,3-dioxygenase,IDO)表达水平、用反相高压液相质谱法测定IDO活性.体内实验中,应用不同浓度3,4-DAA或合并使用西罗莫司进行药物干预,皮肤移植后10 d取移植皮片行病理检查,用蛋白免疫印迹法检测脾脏淋巴细胞单细胞悬液中IDO的表达水平,用反相高压液相质谱法测定移植小鼠血清的IDO活性.结果 体外实验中,MTT检测结果示3,4-DAA对小鼠脾脏淋巴细胞增殖有抑制作用,呈现明显的剂量效应关系(P<0.05~P<0.01);在倒置显微镜下观察,与c1组比较,c3组、c2组皮肤移植小鼠的脾脏淋巴细胞悬液中的淋巴细胞生长明显受抑制,且c3组的淋巴细胞生长抑制较之c2组更显著,显示3,4-DAA有抑制脾脏淋巴细胞生长的作用.体内实验中,给予3,4-DAA处理组小鼠移植皮肤免疫损伤程度明显减轻.体外实验与体内实验结果示3,4-DAA处理组IDO表达水平、IDO活性较空白对照组均明显提高(P<0.05~P<0.01).结论 3,4-DAA能够抑制小鼠皮肤移植排斥反应,显著减轻移植物排斥损伤,其作用机制是通过增强IDO活性实现的.

 

关键词: N-(3,4-二甲氧基肉桂酰)邻氨基苯甲酸,曲尼司特,吲哚胺2,3-二氧化酶,免疫调节,皮肤移植

中图分类号: R617

基金资助: 卫生部国际交流与合作课题,上海市科委重点科技攻关项目

作者单位: 上海交通大学医学院附属瑞金医院肾脏移植中心,200025

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收稿日期: 2016-10-14

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