小鼠胰岛提取方法改良的实验研究
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小鼠胰岛提取方法改良的实验研究

Experimental study of a modified extraction method of mouse islets

曾文 刘坤莹 林楚文 林硕 彭航娅 李海成 曾龙驿

Zeng Wen, Liu Kunying, Lin Chuwen, Lin Shuo, Peng Hangya, Li Haicheng, Zeng Longyi

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引用本文:

【摘要】 目的 探讨小鼠胰岛提取方法的改良及效果。方法 根据胰岛提取方法不同,将小鼠随机分为胆
总管穿刺组和胆总管穿刺联合胰腺原位注射组(联合注射组),每组各 100 只。胰岛提取的改良方法采用胆总
管穿刺联合胰腺原位注射法灌注胰腺,体视显微镜下挑选并纯化胰岛。鉴定胰岛的形态和纯化情况,统计两组
的胰岛产量及胰岛提取成功率。分析胰岛在体外培养 1 周内的存活情况,并评估体外培养 24 h 和 4 d 后胰岛的
胰岛素分泌功能。结果 与胆总管穿刺组比较,联合注射组提取胰岛的产量显著增高(P<0.001)。两组胰岛提
取成功率均为 83%,差异无统计学意义(P>0.05)。胆总管穿刺联合胰腺原位注射法所提取的胰岛形态完好、
纯度高、活性好。新鲜分离的胰岛体外培养 24 h 后胰岛存活率接近 100%;体外培养 1~5 d,胰岛细胞存活情
况良好;体外培养 6 d 开始,胰岛出现中心性死亡。体外培养 24 h 和 4 d 后,给予高葡萄糖刺激胰岛后,小鼠
胰岛功能均正常。结论 胆总管穿刺联合胰腺原位注射法可以提高胰岛的产量,且获取的胰岛细胞活性和功能
良好。

关键词: 胰岛;胰岛移植;胆总管穿刺;原位注射;胰岛素;胰高血糖素;胶原酶 P;双硫腙

中图分类号: R617,R587.1

基金资助: 国家自然科学基金面上项目(51873071);广东省自然科学基金重点项目(2018B030311012)

作者单位: :510630 广州,中山大学附属第三医院内分泌与代谢病科(曾文、刘坤莹、林楚文、林硕、彭航娅、李海成、曾龙驿); 广东省糖尿病防治重点实验室(曾文、刘坤莹、林楚文、彭航娅、李海成、曾龙驿)

作者简介: 曾文,女,1988 年生,博士,住院医师,研究方向为糖尿病,Email:543149311@qq.com

收稿日期: 2020-09-14

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