microRNA-101通过USP22抑制人肝癌MHCC97H细胞的上皮-间质转化功能
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microRNA-101通过USP22抑制人肝癌MHCC97H细胞的上皮-间质转化功能

鲍洁 张娟 王晶

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目的 研究微小核糖核酸(miR)-101对人肝细胞癌(肝癌)MHCC97H细胞的上皮-间质转化功能的影响及其相关机制。 方法 MHCC97H肝癌细胞株分别转染miR-101 mimics和negative control mimic,分别作为M101、NCM组,并设立未转染对照(control)组,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测各组细胞miR-101含量。Transwell实验检测3组细胞迁移能力和侵袭能力。Western-blot法检测3组细胞vimentin、α-catenin、E-cadherin和USP22表达水平。双荧光素酶实验检测miR-101与USP22的关系。结果 M101组miR-101 的表达水平明显上调,表达水平约为control组的761倍(P<0.05)。M101组迁移细胞数量明显低于control组的[(15.7±1.6)比(94.1±1.8),P<0.05]。M101组侵袭细胞数量明显低于control组的[(9.1±0.4)比(51.6±0.9),P<0.05]。M101组细胞vimentin蛋白表达量明显降低,α-catenin及E-cadherin蛋白表达量明显升高,USP22蛋白表达量明显降低。双荧光素酶检验结果显示USP22为miR-101的下游靶基因。结论 miR-101可能通过降低下游靶基因USP22水平影响EMT相关蛋白表达,抑制MHCC97H肝癌细胞的上皮-间质转化功能。

关键词: 肝细胞癌;微小核糖核酸(micro RNA);上皮-间质转化;侵袭;转移;泛素特异性蛋白酶22(USP22);双荧光素酶实验;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)

中图分类号: R617,R735.7

基金资助: 国家自然科学基金(81602723、81201918);广东省科技计划项目(2012B031800099)

作者单位: 510630 广州,华南师范大学医院内科

作者简介:

收稿日期: 2017-06-01

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